Влияние Септолете® Тотал на возбудителя COVID-19
О.В. ФИЛИППОВА
ФГАОУ ВО «Первый Московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова» Минздрава России (Сеченовский Университет), Москва, Россия
Коронавирусы человека известны давно: они от ветственны за 10–15% всех инфекций верхних дыхательных путей [1]. Коронавирусы реплицируются в носоглотке и обычно вызывают легкие инфекции верхних дыхательных путей с короткими ин кубационными периодами, реже – поражение нижних отделов дыхательных путей, в том числе пневмонию [2]. После появления более вирулентных коронавирусов, таких как тяжелый острый респираторный синдром (SARS)-CoV-1 в 2002 г. и ближневосточный респираторный синдром (MERS)-CoV в 2012 г., было признано, что корона вирусы также могут вызывать тяжелые пневмонии с более длительными инкубационными периодами и часто летальным исходом [3]. Новый коронавирус SARS-CoV-2 вызывает коронавирусную болезнь 2019 г. (COVID-19), которая привела к глобальной пандемии, стала причиной гибели людей во всем мире и создала значительные экономические и социальные проблемы [4–6].
SARS-CoV-2 – это вирус размером около 50–200 нм, имеющий оболочку в виде липидного бислоя и одноцепочечный РНК-геном, состоящий примерно из 30 тыс. оснований [7–9]. Вирусы SARS-CoV-2, как и другие респираторные вирусы, в основном передаются через дыхательные выделения в форме капель во время выдоха; кроме того, возможен путь распространения инфекции через контакт с загрязненными поверхностями [7, 9].
SARS-CoV-2 обнаруживается в секрете носоглотки, и его вирусная нагрузка в слюне неизменно высока, глав ным образом на ранней стадии заболевания [10]. Он об наружен в 91,7% образцов слюны у пациентов с COVID-19, а количество инфекционных копий/мл может дости гать 1,2×108 [11]. Слюна является важным источником передачи инфекции во время пандемии COVID-19. Ког да человек кашляет, чихает, дышит или разговаривает, он выделяет капли слюны, содержащие микроорганиз мы [12]. Полость рта считается резервуаром для вирусов, и уменьшение количества вируса в ней может приве сти к предотвращению инфицирования других людей. Снижение вирусной нагрузки в полости рта и глотке не только снижает риск передачи вирусов, но и одновременно уменьшает симптомы у пациентов [13, 14].
Значительный интерес представляет возможность использования в лечении COVID-19 топических лекарственных препаратов, содержащих антисептики. Удаление вирусов, обнаруженных в слюне пациентов, инфицированных COVID-19, направлено на снижение вирусной нагрузки в полости рта. Поскольку SARS-CoV-2 размножается в дыхательной системе, мокрота из верхних дыхательных путей, содержащая инфекционные вирусные частицы, может доставить вирус обратно в полость рта, когда человек говорит или кашляет. Тем не менее роль полости рта как портала для проникновения вируса в организм и как резервуара вируса можно контролировать с помощью применения антисептиков на двух уровнях. Во-первых, снижение вирусной нагрузки SARS-CoV-2 приводит к снижению тяжести COVID-19 [15, 16]. Во-вторых, уменьшается риск передачи вируса (при снижении вирусной нагрузки количество выделяемого вируса пациентом временно сокращается) и риск потенциального распространения инфекции на нижние дыхательные пути.
Преимуществами местной терапии являются эффективное воздействие лекарственного препарата в очаге воспаления, минимальная системная биодоступность, низкий риск развития микробной резистентности [17, 18].
Перспективным средством для защиты от SARS-CoV-2 является цетилпиридиния хлорид (CPC). Как показано в метаанализе, проведенном M. Mateos-Moreno и соавт., среди изученных антисептических средств для защиты от SARS-CoV-2 CPC, согласно имеющимся научным данным, дает наиболее обнадеживающие результаты [14].
CPC, четвертичное аммониевое соединение, которое было впервые описано в 1939 г., широко используется в пищевой, фармацевтической и медицинской промыш ленности, демонстрируя безопасность и эффективность. CPC является одним из наиболее часто используемых антисептиков для лечения и профилактики инфекций ротоглотки, для дезинфекции кожи, слизистых оболочек, очистки твердых поверхностей, дезодорации и производства косметических составов [19–21], в том числе в средствах по уходу за полостью рта.
CPC действует как катионный детергент: ионы аммония проникают через поверхность бактериальной клетки, связываются с микробной цитоплазматической мембраной. Последняя становится проницаемой для низкомолекулярных компонентов, в частности ионов калия. Прямое действие CPC на мембраны липидного бислоя, особенно на цитоплазматическую мембрану, приводит к утечке содержимого микроорганизма. Поскольку CPC разрушает липидный бислой микробов посредством физико-химических взаимодействий, ме ханизм антимикробного действия не зависит от патоге на [22, 23]. Этот механизм обеспечивает широкий спектр активности против различных типов микроорганиз мов: бактерий, грибов и вирусов в оболочке [24, 25]. Кро ме того, подобный механизм действия не допускает раз вития резистентности к CPC [22].
Антимикробная эффективность CPC изучалась в мно гочисленных исследованиях in vitro и in vivo.
CPC проявлял бактерицидное действие в отноше нии грамположительных (в том числе стафилококков и стрептококков) и, в более высоких концентрациях, грам- отрицательных бактерий, таких как Campylobacter rectus, Campylobacter rectus, Eikenella corrodens, Porphyromonas gingivalis, Prevotella intermedia и Solobacterium moorei, а так же Helicobacter pylori [24–27]. Также CPC оказывает фунгицидное действие [28].
Важным свойством CPC является способность воздействовать на микроорганизмы в составе биопленки бла годаря высокой способности к проникновению внутрь различных субстратов биопленок. Многочисленные исследования убедительно демонстрируют эффекты разрушения матрикса биопленки (гликокаликса) и гибели микроорганизмов [29–31].
Доказана эффективность CPC против респираторных вирусных патогенов, таких как грипп (четыре рода в семействе Orthomyxoviridae: грипп A, B, C и D). CPC также обладает значительной активностью в отношении других вирусов, находящихся в оболочке, таких как респираторный синцитиальный вирус RSV, парагрипп, полио- вирус I типа, коронавирус и др. [17, 32]. CPC может быть использован для предотвращения вирусной инвазии и развития заболеваний, вызываемых респираторными вирусами. Потенциальная активность CPC против патогенов, не покрытых оболочкой, включая риновирус, бокавирус или аденовирус, остается неясной.
Имеются также данные о клинической эффективности CPC при острых респираторных вирусных инфекциях. Так, в рандомизированном двойном слепом клиническом исследовании продемонстрировано, что местная пероральная форма CPC хорошо переносится и уменьшает тяжесть и продолжительность кашля и боли в горле у зарегистрированных участников исследования по сравнению с контрольной группой [33].
В другом клиническом исследовании отмечено, что у группы пациентов, которые использовали 0,10% CPC в течение 75 дней в форме перорального спрея, была более низкая частота вирусных инфекций верхних дыхательных путей. Показано, что использование спрея, содержащего СРС, привело к улучшению состояния больных острой респираторной вирусной инфекцией, при этом вирусы гриппа В, коронавирус или риновирус определлись только в группе плацебо [33].
Поскольку коронавирусы относятся к разряду оболочечных вирусов с липидной оболочкой, которая может быть разрушена за счет солюбилизации липидов или повреждения гликопротеинов при помощи CPC, следовало ожидать защитного действия СРС против SARS-CoV-2.
Вирулицидная активность CPC против SARS-CoV-2 показана в ряде исследований. В рандомизированном двойном слепом плацебо-контролируемом одноцентровом пилотном клиническом исследовании влияния различных типов ополаскивателей для рта показано, что использование CPC временно уменьшило биологическую нагрузку SARS-CoV-2 в слюне у пациентов с COVID-19 [34].
Имеется исследование по сравнению вирулицидной способности четырех антисептиков, среди которых CPC, против коронавируса HCoV-229e, который обладает иной патогенностью, но по структуре схож с SARS-CoV-2, поскольку они принадлежат к одному семейству и являются респираторными патогенами человека. Растворы для полоскания носа и рта были протестированы на их способность инактивировать высокие концентрации HCoV-229e. Продукты с CPC были очень эффективны в инактивации вирусной инфекции при снижении вирусной нагрузки более чем на 99,9%, даже при времени контакта 30 с [35].
Наконец, в рандомизированном клиническом исследовании оценена эффективность трех коммерческих средств для полоскания рта, в том числе с CPC, с точки зрения снижения вирусной нагрузки на слюнные железы при SARS-CoV-2 у пациентов с COVID-19 по сравнению с водой. Вирусная нагрузка на слюнные железы снижалась при использовании CPC для полоскания рта, и этот эффект сохранялся в течение 6 ч [36].
В настоящее время появился ряд сообщений о возможности использовать СРС в виде полоскания для рта с целью защиты от SARS-CoV-2 [37, 38]. Вместе с тем не стоит ограничивать интерес к использованию СРС против SARS-CoV-2 только данной лекарственной формой, учитывая огромное количество различных по составу и форме топических препаратов для лечения пациентов с патологией ротовой полости и глотки.
Более эффективной лекарственной формой по срав нению с растворами для полоскания являются пастил ки для рассасывания, обеспечивающие более длительную экспозицию действующего вещества. По данным γ-сцинтиграфии лекарственное вещество, помеченное радиоизотопом, дольше сохраняется на слизистой оболочке глотки и полости рта при использовании таблетки для рассасывания и аэрозоля/спрея, чем при использовании средства для полоскания [17].
Применение препаратов в виде таблеток или пастилок для рассасывания в отличие от других форм выпуска позволяет действующему веществу эффективно воздействовать на всю поверхность слизистой оболочки ротоглотки, включая даже труднодоступные участки. Применение местных препаратов в виде растворов для полоскания может вызывать сложности у детей, так как требует умения задерживать дыхание и не проглатывать препарат во время полоскания горла. Длительное рассасывание таблетки приводит к активному слюноотделению и, как следствие, более длительному воздействию активных компонентов на слизистые оболочки, что благоприятно сказывается на эффективности действия препарата. При этом риск развития побочных эффектов или передозировки минимален [17, 39].
Пастилки могут содержать не только СРС, но и другие вещества, потенциально полезные при инфекциях, в том числе при COVID-19.
Препарат Cептoлете® Тотал – таблетки для рассасывания, содержащие в своем составе СРС и бензидамин. Бензидамин (BH) – нестероидный противовоспалительный препарат, обладающий противовоспалительным, обезболивающим и местноанестезирующим действием. При использовании Септолете® Тотал облегчается течение болевого синдрома воспалительных заболеваний полости рта и ЛОР-органов различной этиологии1.
В новейшем словенском исследовании изучено вирулицидное действие таблетки для рассасывания, содержащей фиксированную комбинацию BH и CPC, на SARS-CoV-2 [39]. В лаборатории были смоделированы условия, соответствующие применению таблетки для рассасывания. SARS-CoV-2 инкубировали с тремя разными концентрациями каждого из активных веществ таблетки для рассасывания с временем экспозиции 1, 5 и 15 мин. В культурах клеток определяли вирусные частицы и рассчитывали титр вируса соответственно. Все активные субстанции продемонстрировали способность снижать вирусный титр в разной степени выраженности (рис. 1).
Установлено, что комбинация BH+CPC уничтожает вирусные частицы SARS-CoV-2. Скорость снижения числа вирусов падала с уменьшением концентрации испытуемого продукта. Наиболее высокая концентрация комбинации BH+CPC в форме таблетки для рассасывания продемонстрировала наиболее быстрый вирулицидный эффект по сравнению с CPC в качестве свободного активного вещества. При времени контакта всего 1 мин комбинация BH + CPC снизила исходную концентрацию вируса более чем на 99,99%.
Важным и дополнительным открытием этого исследования является высокоэффективная вирулицидная активность комбинации BH/CPC (в качестве либо таблетки, либо свободного активного вещества) и ее более быстрый эффект по сравнению с одним CPC. Авторы предположили, что BH, т.е. дополнительный компонент, оказывает влияние на дестабилизацию и потерю ви рулентности вирусных частиц. Кроме того, более низкое значение рН суспензии таблетки для рассасывания BH/CPC может быть дополнительным фактором, способствующим быстрому снижению вирулентности SARS-CoV-2. Исследования подтвердили, что значение рН оказывает важное влияние на стабильность корона вируса в окружающей среде и его вирулентность [40]. Как в экстремально кислой, так и в экстремально щелочной среде вирусные белки на поверхности необратимо денатурировались, вызывая потерю вирулентности.
Вирулицидный эффект CPC и таблетки для рассасыва ния BH/CPC дополнительно отмечен при морфологиче ском анализе вирусных частиц (рис. 2). Отрицательные контрольные образцы, наблюдаемые под электронным микроскопом, содержали интактные вирусные частицы без видимых морфологических изменений или повреж дений; присутствовали четко выраженные пепломеры S-белка (корона), была зарегистрирована интактная ви русная оболочка (рис. 2, a, b). После инкубационного пе риода вируса в суспензиях CPC в качестве свободного активного вещества и BH/CPC в виде таблетки для расса сывания отмечено разрушение оболочки вируса. После инкубации с пастилкой BH/CPC наблюдали дестабили зацию нуклеокапсида. Разрушение вирусной оболочки сопровождалось накоплением контраста внутри вируса (черный центр вируса на рис. 2, c–f).
Заключение
Поскольку рот и горло являются главным местом репликации вируса SARS-CoV-2 на ранних стадиях болезни, применение местных средств, которые могут повредить или разрушить липидную оболочку вируса, может потенциально снизить вирусную нагрузку в ротоглотке.
Результаты исследований, проведенных в контролируемых лабораторных условиях, имитирующих физиологические условия ротовой полости, показали, что CPC как отдельно, так и в комбинации с BH разрушали коронавирусы. Установлено, что CPC, BH/CPC в виде свободного активного вещества, как и BH/CPC в форме таблетки для рассасывания, продемонстрировали выраженную вирулицидную активность в условиях in vitro. Подтверждена значительная разница в выраженности вирулицидного эффекта между таблетками для рассасывания в комбинации BH/CPC и таблетками для рассасывания плацебо, а также более сильный эффект комби нации BH/CPC либо в форме таблеток для рассасывания, либо в виде свободного активного вещества по сравнению с одним CPC.
На основании имеющихся данных существует высокая вероятность того, что таблетки для рассасывания Cептoлете® Тотал будут не только оказывать положи тельное влияние на симптомы болезни (боль, диском форт в горле), но и снижать риск заражения окружающих, а также повышать вероятность более легкого течения заболевания COVID-19.
ЛИТЕРАТУРА
ФГАОУ ВО «Первый Московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова» Минздрава России (Сеченовский Университет), Москва, Россия
Коронавирусы человека известны давно: они от ветственны за 10–15% всех инфекций верхних дыхательных путей [1]. Коронавирусы реплицируются в носоглотке и обычно вызывают легкие инфекции верхних дыхательных путей с короткими ин кубационными периодами, реже – поражение нижних отделов дыхательных путей, в том числе пневмонию [2]. После появления более вирулентных коронавирусов, таких как тяжелый острый респираторный синдром (SARS)-CoV-1 в 2002 г. и ближневосточный респираторный синдром (MERS)-CoV в 2012 г., было признано, что корона вирусы также могут вызывать тяжелые пневмонии с более длительными инкубационными периодами и часто летальным исходом [3]. Новый коронавирус SARS-CoV-2 вызывает коронавирусную болезнь 2019 г. (COVID-19), которая привела к глобальной пандемии, стала причиной гибели людей во всем мире и создала значительные экономические и социальные проблемы [4–6].
SARS-CoV-2 – это вирус размером около 50–200 нм, имеющий оболочку в виде липидного бислоя и одноцепочечный РНК-геном, состоящий примерно из 30 тыс. оснований [7–9]. Вирусы SARS-CoV-2, как и другие респираторные вирусы, в основном передаются через дыхательные выделения в форме капель во время выдоха; кроме того, возможен путь распространения инфекции через контакт с загрязненными поверхностями [7, 9].
SARS-CoV-2 обнаруживается в секрете носоглотки, и его вирусная нагрузка в слюне неизменно высока, глав ным образом на ранней стадии заболевания [10]. Он об наружен в 91,7% образцов слюны у пациентов с COVID-19, а количество инфекционных копий/мл может дости гать 1,2×108 [11]. Слюна является важным источником передачи инфекции во время пандемии COVID-19. Ког да человек кашляет, чихает, дышит или разговаривает, он выделяет капли слюны, содержащие микроорганиз мы [12]. Полость рта считается резервуаром для вирусов, и уменьшение количества вируса в ней может приве сти к предотвращению инфицирования других людей. Снижение вирусной нагрузки в полости рта и глотке не только снижает риск передачи вирусов, но и одновременно уменьшает симптомы у пациентов [13, 14].
Значительный интерес представляет возможность использования в лечении COVID-19 топических лекарственных препаратов, содержащих антисептики. Удаление вирусов, обнаруженных в слюне пациентов, инфицированных COVID-19, направлено на снижение вирусной нагрузки в полости рта. Поскольку SARS-CoV-2 размножается в дыхательной системе, мокрота из верхних дыхательных путей, содержащая инфекционные вирусные частицы, может доставить вирус обратно в полость рта, когда человек говорит или кашляет. Тем не менее роль полости рта как портала для проникновения вируса в организм и как резервуара вируса можно контролировать с помощью применения антисептиков на двух уровнях. Во-первых, снижение вирусной нагрузки SARS-CoV-2 приводит к снижению тяжести COVID-19 [15, 16]. Во-вторых, уменьшается риск передачи вируса (при снижении вирусной нагрузки количество выделяемого вируса пациентом временно сокращается) и риск потенциального распространения инфекции на нижние дыхательные пути.
Преимуществами местной терапии являются эффективное воздействие лекарственного препарата в очаге воспаления, минимальная системная биодоступность, низкий риск развития микробной резистентности [17, 18].
Перспективным средством для защиты от SARS-CoV-2 является цетилпиридиния хлорид (CPC). Как показано в метаанализе, проведенном M. Mateos-Moreno и соавт., среди изученных антисептических средств для защиты от SARS-CoV-2 CPC, согласно имеющимся научным данным, дает наиболее обнадеживающие результаты [14].
CPC, четвертичное аммониевое соединение, которое было впервые описано в 1939 г., широко используется в пищевой, фармацевтической и медицинской промыш ленности, демонстрируя безопасность и эффективность. CPC является одним из наиболее часто используемых антисептиков для лечения и профилактики инфекций ротоглотки, для дезинфекции кожи, слизистых оболочек, очистки твердых поверхностей, дезодорации и производства косметических составов [19–21], в том числе в средствах по уходу за полостью рта.
CPC действует как катионный детергент: ионы аммония проникают через поверхность бактериальной клетки, связываются с микробной цитоплазматической мембраной. Последняя становится проницаемой для низкомолекулярных компонентов, в частности ионов калия. Прямое действие CPC на мембраны липидного бислоя, особенно на цитоплазматическую мембрану, приводит к утечке содержимого микроорганизма. Поскольку CPC разрушает липидный бислой микробов посредством физико-химических взаимодействий, ме ханизм антимикробного действия не зависит от патоге на [22, 23]. Этот механизм обеспечивает широкий спектр активности против различных типов микроорганиз мов: бактерий, грибов и вирусов в оболочке [24, 25]. Кро ме того, подобный механизм действия не допускает раз вития резистентности к CPC [22].
Антимикробная эффективность CPC изучалась в мно гочисленных исследованиях in vitro и in vivo.
CPC проявлял бактерицидное действие в отноше нии грамположительных (в том числе стафилококков и стрептококков) и, в более высоких концентрациях, грам- отрицательных бактерий, таких как Campylobacter rectus, Campylobacter rectus, Eikenella corrodens, Porphyromonas gingivalis, Prevotella intermedia и Solobacterium moorei, а так же Helicobacter pylori [24–27]. Также CPC оказывает фунгицидное действие [28].
Важным свойством CPC является способность воздействовать на микроорганизмы в составе биопленки бла годаря высокой способности к проникновению внутрь различных субстратов биопленок. Многочисленные исследования убедительно демонстрируют эффекты разрушения матрикса биопленки (гликокаликса) и гибели микроорганизмов [29–31].
Доказана эффективность CPC против респираторных вирусных патогенов, таких как грипп (четыре рода в семействе Orthomyxoviridae: грипп A, B, C и D). CPC также обладает значительной активностью в отношении других вирусов, находящихся в оболочке, таких как респираторный синцитиальный вирус RSV, парагрипп, полио- вирус I типа, коронавирус и др. [17, 32]. CPC может быть использован для предотвращения вирусной инвазии и развития заболеваний, вызываемых респираторными вирусами. Потенциальная активность CPC против патогенов, не покрытых оболочкой, включая риновирус, бокавирус или аденовирус, остается неясной.
Имеются также данные о клинической эффективности CPC при острых респираторных вирусных инфекциях. Так, в рандомизированном двойном слепом клиническом исследовании продемонстрировано, что местная пероральная форма CPC хорошо переносится и уменьшает тяжесть и продолжительность кашля и боли в горле у зарегистрированных участников исследования по сравнению с контрольной группой [33].
В другом клиническом исследовании отмечено, что у группы пациентов, которые использовали 0,10% CPC в течение 75 дней в форме перорального спрея, была более низкая частота вирусных инфекций верхних дыхательных путей. Показано, что использование спрея, содержащего СРС, привело к улучшению состояния больных острой респираторной вирусной инфекцией, при этом вирусы гриппа В, коронавирус или риновирус определлись только в группе плацебо [33].
Поскольку коронавирусы относятся к разряду оболочечных вирусов с липидной оболочкой, которая может быть разрушена за счет солюбилизации липидов или повреждения гликопротеинов при помощи CPC, следовало ожидать защитного действия СРС против SARS-CoV-2.
Вирулицидная активность CPC против SARS-CoV-2 показана в ряде исследований. В рандомизированном двойном слепом плацебо-контролируемом одноцентровом пилотном клиническом исследовании влияния различных типов ополаскивателей для рта показано, что использование CPC временно уменьшило биологическую нагрузку SARS-CoV-2 в слюне у пациентов с COVID-19 [34].
Имеется исследование по сравнению вирулицидной способности четырех антисептиков, среди которых CPC, против коронавируса HCoV-229e, который обладает иной патогенностью, но по структуре схож с SARS-CoV-2, поскольку они принадлежат к одному семейству и являются респираторными патогенами человека. Растворы для полоскания носа и рта были протестированы на их способность инактивировать высокие концентрации HCoV-229e. Продукты с CPC были очень эффективны в инактивации вирусной инфекции при снижении вирусной нагрузки более чем на 99,9%, даже при времени контакта 30 с [35].
Наконец, в рандомизированном клиническом исследовании оценена эффективность трех коммерческих средств для полоскания рта, в том числе с CPC, с точки зрения снижения вирусной нагрузки на слюнные железы при SARS-CoV-2 у пациентов с COVID-19 по сравнению с водой. Вирусная нагрузка на слюнные железы снижалась при использовании CPC для полоскания рта, и этот эффект сохранялся в течение 6 ч [36].
В настоящее время появился ряд сообщений о возможности использовать СРС в виде полоскания для рта с целью защиты от SARS-CoV-2 [37, 38]. Вместе с тем не стоит ограничивать интерес к использованию СРС против SARS-CoV-2 только данной лекарственной формой, учитывая огромное количество различных по составу и форме топических препаратов для лечения пациентов с патологией ротовой полости и глотки.
Более эффективной лекарственной формой по срав нению с растворами для полоскания являются пастил ки для рассасывания, обеспечивающие более длительную экспозицию действующего вещества. По данным γ-сцинтиграфии лекарственное вещество, помеченное радиоизотопом, дольше сохраняется на слизистой оболочке глотки и полости рта при использовании таблетки для рассасывания и аэрозоля/спрея, чем при использовании средства для полоскания [17].
Применение препаратов в виде таблеток или пастилок для рассасывания в отличие от других форм выпуска позволяет действующему веществу эффективно воздействовать на всю поверхность слизистой оболочки ротоглотки, включая даже труднодоступные участки. Применение местных препаратов в виде растворов для полоскания может вызывать сложности у детей, так как требует умения задерживать дыхание и не проглатывать препарат во время полоскания горла. Длительное рассасывание таблетки приводит к активному слюноотделению и, как следствие, более длительному воздействию активных компонентов на слизистые оболочки, что благоприятно сказывается на эффективности действия препарата. При этом риск развития побочных эффектов или передозировки минимален [17, 39].
Пастилки могут содержать не только СРС, но и другие вещества, потенциально полезные при инфекциях, в том числе при COVID-19.
Препарат Cептoлете® Тотал – таблетки для рассасывания, содержащие в своем составе СРС и бензидамин. Бензидамин (BH) – нестероидный противовоспалительный препарат, обладающий противовоспалительным, обезболивающим и местноанестезирующим действием. При использовании Септолете® Тотал облегчается течение болевого синдрома воспалительных заболеваний полости рта и ЛОР-органов различной этиологии1.
В новейшем словенском исследовании изучено вирулицидное действие таблетки для рассасывания, содержащей фиксированную комбинацию BH и CPC, на SARS-CoV-2 [39]. В лаборатории были смоделированы условия, соответствующие применению таблетки для рассасывания. SARS-CoV-2 инкубировали с тремя разными концентрациями каждого из активных веществ таблетки для рассасывания с временем экспозиции 1, 5 и 15 мин. В культурах клеток определяли вирусные частицы и рассчитывали титр вируса соответственно. Все активные субстанции продемонстрировали способность снижать вирусный титр в разной степени выраженности (рис. 1).
Установлено, что комбинация BH+CPC уничтожает вирусные частицы SARS-CoV-2. Скорость снижения числа вирусов падала с уменьшением концентрации испытуемого продукта. Наиболее высокая концентрация комбинации BH+CPC в форме таблетки для рассасывания продемонстрировала наиболее быстрый вирулицидный эффект по сравнению с CPC в качестве свободного активного вещества. При времени контакта всего 1 мин комбинация BH + CPC снизила исходную концентрацию вируса более чем на 99,99%.
Важным и дополнительным открытием этого исследования является высокоэффективная вирулицидная активность комбинации BH/CPC (в качестве либо таблетки, либо свободного активного вещества) и ее более быстрый эффект по сравнению с одним CPC. Авторы предположили, что BH, т.е. дополнительный компонент, оказывает влияние на дестабилизацию и потерю ви рулентности вирусных частиц. Кроме того, более низкое значение рН суспензии таблетки для рассасывания BH/CPC может быть дополнительным фактором, способствующим быстрому снижению вирулентности SARS-CoV-2. Исследования подтвердили, что значение рН оказывает важное влияние на стабильность корона вируса в окружающей среде и его вирулентность [40]. Как в экстремально кислой, так и в экстремально щелочной среде вирусные белки на поверхности необратимо денатурировались, вызывая потерю вирулентности.
Вирулицидный эффект CPC и таблетки для рассасыва ния BH/CPC дополнительно отмечен при морфологиче ском анализе вирусных частиц (рис. 2). Отрицательные контрольные образцы, наблюдаемые под электронным микроскопом, содержали интактные вирусные частицы без видимых морфологических изменений или повреж дений; присутствовали четко выраженные пепломеры S-белка (корона), была зарегистрирована интактная ви русная оболочка (рис. 2, a, b). После инкубационного пе риода вируса в суспензиях CPC в качестве свободного активного вещества и BH/CPC в виде таблетки для расса сывания отмечено разрушение оболочки вируса. После инкубации с пастилкой BH/CPC наблюдали дестабили зацию нуклеокапсида. Разрушение вирусной оболочки сопровождалось накоплением контраста внутри вируса (черный центр вируса на рис. 2, c–f).
Заключение
Поскольку рот и горло являются главным местом репликации вируса SARS-CoV-2 на ранних стадиях болезни, применение местных средств, которые могут повредить или разрушить липидную оболочку вируса, может потенциально снизить вирусную нагрузку в ротоглотке.
Результаты исследований, проведенных в контролируемых лабораторных условиях, имитирующих физиологические условия ротовой полости, показали, что CPC как отдельно, так и в комбинации с BH разрушали коронавирусы. Установлено, что CPC, BH/CPC в виде свободного активного вещества, как и BH/CPC в форме таблетки для рассасывания, продемонстрировали выраженную вирулицидную активность в условиях in vitro. Подтверждена значительная разница в выраженности вирулицидного эффекта между таблетками для рассасывания в комбинации BH/CPC и таблетками для рассасывания плацебо, а также более сильный эффект комби нации BH/CPC либо в форме таблеток для рассасывания, либо в виде свободного активного вещества по сравнению с одним CPC.
На основании имеющихся данных существует высокая вероятность того, что таблетки для рассасывания Cептoлете® Тотал будут не только оказывать положи тельное влияние на симптомы болезни (боль, диском форт в горле), но и снижать риск заражения окружающих, а также повышать вероятность более легкого течения заболевания COVID-19.
ЛИТЕРАТУРА
- Eccles R. Understanding the symptoms of the common cold and influenza. Lancet Infect Dis. 2005;5(11):718-25. DOI:10.1016/S1473-3099(05)70270-X
- Su S, Wong G, Shi W, et al. Epidemiology, Genetic Recombination, and Pathogenesis of Coronaviruses. Trends Microbiol. 2016;24(6):490-502. DOI:10.1016/j.tim.2016.03.003
- De Wit E, van Doremalen N, Falzarano D, Munster VJ. 2016 SARS and MERS: Recent insights into emerging coronaviruses. Nat Rev Microbiol. 2016;14(8):523-34. DOI:10.1038/nrmicro.2016.81
- Worldometer. Coronavirus Cases. 2021. Available at: https://www.worldometers.info/coronavirus/?zarsrc=130. Accessed: 22.04.2021
- Wan S, Xiang Y, Fang W, et al. Clinical features and treatment of COVID‐19 patients in northeast Chongqing. J Med Virol. 2020;92(7):797-806. DOI:10.1002/jmv.25783
- Hassan SA, Sheikh FN, Jamal S, et al. Coronavirus (COVID-19): A Review of Clinical Features, Diagnosis, and Treatment. Cureus. 2020;12(3):e7355. DOI:10.7759/cureus.7355
- Бевова М.Р., Нетесов С.В., Аульченко Ю.С. Новая коронавирусная инфекция COVID-19. Молекулярная генетика, микробиология и вирусология. 2020;38(2):51-8. DOI:10.17116/molgen20203802151
- Хайтович А.Б. Коронавирусы (таксономия, структура вируса). Крымский журнал экспериментальной и клинической медицины. 2020;10(3):69-81. DOI:10.37279/2224-6444-2020-10-3-69-81
- Супотницкий М.В. Новый коронавирус SARS-CoV-2 в аспекте глобальной эпидемиологии коронавирусных инфекций. Вестник войск РХБ защиты. 2020;4(1):32-65. DOI:10.35825/2587-5728-2020-4-1-32-65
- Yoon JG, Yoon J, Song JY, et al. Clinical significance of a high SARS-CoV-2 viral load in the saliva. J Korean Med Sci. 2020;35(20):e195. DOI:10.3346/jkms.2020.35.e195
- To KK, Tsang OT, Yip CC, et al. Consistent Detection of 2019 Novel Coronavirus in Saliva. Clin Infect Dis. 2020;71(15):841-3. DOI:10.1093/cid/ciaa149
- Baghizadeh Fini M. Oral saliva and COVID-19. Oral Oncol. 2020;108:104821. DOI:10.1016/j.oraloncology.2020.104821
- Herrera D, Serrano J, Roldán S, Sanz M. Is the oral cavity relevant in SARS-CoV-2 pandemic? Clin Oral Investig. 2020;24(8):2925-30. DOI:10.1007/s00784-020-03413-2
- Mateos-Moreno MV, Mira A, Ausina-Márquez V, Ferrer MD. Oral antiseptics against coronavirus: in-vitro and clinical evidence. J Hosp Infect. 2021;113:30-43. DOI:10.1016/j.jhin.2021.04.004
- Xu R, Cui B, Duan X, et al. Saliva: potential diagnostic value and transmission of 2019-nCoV. Int J Oral Sci. 2020;12(1):11. DOI:10.1038/s41368-020-0080-z
- Hormati A, Ghadir MR, Foroghi Ghomi SY, et al. Can increasing the number of close contact lead to more mortality in COVID-19 infected patients? Iran J Public Health. 2020;49(Suppl. 1):117-8. DOI:10.18502/ijph.v49is1.3680
- Свистушкин В.М., Никифорова Г.Н., Шевчик Е.А., Топоркова Л.А. Эффективность топических препара тов в лечении больных острыми воспалительными заболеваниями глотки. Вестник оториноларин гологии. 2019;84(6):112-7. DOI:10.17116/otorino201984061112
- Morokutti-Kurz M, Graf C, Prieschl-Grassauer E. Amylmetacresol/2,4-dichlorobenzyl alcohol, hexylresorcinol, or carrageenan lozenges as active treatments for sore throat. Int J Gen Med. 2017;10:53-60. DOI:10.2147/IJGM.S120665
- Paley O. Cetylpyridinium chloride. Synlett. 2014;25:599-600. DOI:10.1055/s-0033-1340488
- McDonnell G, Russell AD. Antiseptics and disinfectants: activity, action, and resistance. Clin Microbiol Rev. 1999;12(1):147-79. DOI:10.1128/CMR.12.1.147
- Quisno R, Foter MJ. Cetyl pyridinium chloride: I. Germicidal properties. J Bacteriol. 1946;52:111-7. DOI:10.1128/JB.52.1.111-117.1946
- Gilbert P, Moore LE. Cationic antiseptics: diversity of action under a common epithet. J Appl Microbiol. 2005;99(4):703-15. DOI:10.1111/j.1365-2672.2005.02664.x
- Carmona-Ribeiro AM, de Melo Carrasco LD. Cationic antimicrobial polymers and their assemblies. Int J Mol Sci. 2013;14(5):9906-46. DOI:10.3390/ijms14059906
- Pitten FA, Kramer A. Efficacy of cetylpyridinium chloride used as oropharyngeal antiseptic. Arzneimittelforschung. 2001;51(7):588-95. DOI:10.1055/s-0031-1300084
- Maillard JY. Bacterial target sites for biocide action. J Appl Microbiol. 2002;92 Suppl.:16S-27S.
- Bereswill S, Vey T, Kist M. Susceptibility in vitro of Helicobacter pylori to cetylpyridinium chloride. FEMS Immunol Med Microbiol. 1999;24(2):189-92. DOI:10.1111/j.1574-695X.1999.tb01281.x
- Latimer J, Munday JL, Buzza KM, et al. Antibacterial and anti-biofilm activity of mouthrinses containing cetylpyridinium chloride and sodium fluoride. BMC Microbiol. 2015;15:169. DOI:10.1186/s12866-015-0501-x
- Giuliana G, Pizzo G, Milici ME, Giangreco R. In vitro activities of antimicrobial agents against Candida species. Oral Surg Oral Med Oral Pathol Oral Radiol Endod. 1999;87(1):44-9. DOI:10.1016/s1079-2104(99)70293-3
- Mao X, Auer DL, Buchalla W, et al. Cetylpyridinium Chloride: Mechanism of Action, Antimicrobial Efficacy in Biofilms, and Potential Risks of Resistance. Antimicrob Agents Chemother. 2020;64(8):e00576-20. DOI:10.1128/AAC.00576-20
- Cieplik F, Kara E, Muehler D, et al. Antimicrobial efficacy of alternative compounds for use in oral care toward biofilms from caries‐associated bacteria in vitro. Microbiologyopen. 2019;8(4):e00695. DOI:10.1002/mbo3.695
- Smith K, Robertson DP, Lappin DF, Ramage G. Commercial mouthwashes are ineffective against oral MRSA biofilms. Oral Surg Oral Med Oral Pathol Oral Radiol. 2013;115(5):624-9. DOI:10.1016/j.oooo.2012.12.014
- Popkin DL, Zilka S, Dimaano M, et al. Cetylpyridinium chloride (CPC) exhibits potent, rapid activity against influenza viruses in vitro and in vivo. Pathog Immun. 2017;2(2):253-69. DOI:10.20411/pai.v2i2.200
- Mukherjee PK, Esper F, Buchheit K, et al. Randomized, double-blind, placebo-controlled clinical trial to assess the safety and effectiveness of a novel dual-action oral topical formulation against upper respiratory infections. BMC Infect Dis. 2017;17(1):74. DOI:10.1186/s12879-016-2177-8
- Eduardo FP, Corrêa L, Heller D, et al. Salivary SARS-CoV-2 load reduction with mouthwash use: A randomized pilot clinical trial. Heliyon. 2021;7(6):e07346. DOI:10.1016/j.heliyon.2021.e07346
- Meyers C, Robison R, Milici J, et al. Lowering the transmission and spread of human coronavirus. J Med Virol. 2021:93(3):1605-12. DOI:10.1002/jmv.26514
- Seneviratne C, Balan P, Kwan KK, Udawatte NS. Efficacy of commercial mouth-rinses on SARS-CoV-2 viral load in saliva: randomized control trial in Singapore Chaminda. Infection. 2021;49(2):305-11. DOI:10.1007/s15010-020-01563-9
- Carrouel F, Gonçalves LS, Conte MP, et al. Antiviral Activity of Reagents in Mouth Rinses against SARS-CoV-2. J Dent Res. 2021;100(2):124-32. DOI:10.1177/0022034520967933
- Baker N, Williams AJ, Tropsha A, Ekins S. Repurposing Quaternary Ammonium Compounds as Potential Treatments for COVID-19. Pharm Res. 2020;37(6):104. DOI:10.1007/s11095-020-02842-8
- Steyer A, Marušić M, Kolenc M, Triglav T. A Throat Lozenge with Fixed Combination of Cetylpyridinium Chloride and Benzydamine Hydrochloride Has Direct Virucidal Effect on SARS-CoV-2. COVID. 2021;1(2):435-46. DOI:10.3390/covid1020037
- Darnell MER, Subbarao K, Feinstone SM, Taylor DR. Inactivation of the coronavirus that induces severe acute respiratory syndrome, SARS-CoV. J Virol Methods. 2004;121(1):85-91. DOI:10.1016/j.jviromet.2004.06.006